BrdU-soluproliferaatiomäärityspakkaus havaitsee 5-bromi-2′-deoksiuridiinin (BrdU), joka on sisällytetty solun DNA: han solujen lisääntymisen aikana käyttämällä anti-BrdU-vasta-ainetta. Kun soluja viljellään leimausväliaineella, joka sisältää BrdU: ta, tämä pyrimidiinianalogi sisällytetään tymidiinin sijasta vasta-syntetisoituun lisääntyvien solujen DNA: han. Leimausväliaineen poistamisen jälkeen solut kiinnitetään ja DNA denaturoidaan kiinnitys- / denaturointiliuoksellamme. DNA: n denaturointi on tarpeen sisällytetyn BrdU: n pääsyn parantamiseksi detektiovasta-aineeseen. BrdU-hiiren mAb lisätään sitten sisällytetyn BrdU: n havaitsemiseksi. Hiiren vastaista IgG: tä, HRP-kytkettyä vasta-ainetta käytetään sitoutuneen detektiovasta-aineen tunnistamiseen. Kemiluminesoivaa reagenssia lisätään signaalin kehittämiseksi. Valopäästön suuruus mitattuna suhteellisissa valoyksiköissä (RLU),
Spesifisyys / herkkyys
BrdU-soluproliferaatiokemiluminesenssimäärityspaketti havaitsee BrdU: n liittymisen solun DNA: han solujen lisääntymisen aikana. BrdU-leimattu DNA on denaturoitava, jotta se voidaan havaita tässä pakkauksessa käytetyllä BrdU-hiiren mAb: lla. Tämä BrdU-hiiren mAb ei ristireagoi endogeenisen DNA: n kanssa. Riippuen solutyypistä ja inkubaatioaika käytetään määrityksessä, 0,2-2 x 10 4 solua / kuoppa ovat riittävät kokeellisesti asetelmia. Parhaan tuloksen saavuttamiseksi suositellaan solunumerotitrausta (kuva 1).
Havaitsemisperiaate
WST-8 on MTT: n kaltainen yhdiste, joka voidaan pelkistää oranssiksi formazaaniksi jonkin verran dehydrogenaasia mitokondrioissa elektronikytkentäreagenssin läsnä ollessa. Mitä enemmän ja nopeammin solut lisääntyvät, sitä tummempi väri on ja mitä sytotoksisempi, sitä vaaleampi väri on. Samoille soluille värisyvyyden ja solujen lukumäärän välillä on lineaarinen suhde.
Komponentit
Kissa.
Tuotteet
100 testiä
500 testiä
10000 testiä
Varastointi
E-CK-A362
Parannettu CCK-8-puskuri
1 ml
5 ml
100 ml
-20 ° C
Manuaalinen
Yksi kopio
Varastointi
Säilytä 2 ~ 8 ° C: ssa vuoden ajan pimeässä. Pitkäaikaista varastointia varten säilytä -20 ° C: ssa ja säilyvyysaika voi olla kaksi vuotta.
Solususpensio sekoitetaan ennen kuoppiin lisäämistä, jotta vältetään solujen saostuminen, joka johtaa eri solumääriin kussakin kuopassa.
CCK-8: n optimaalinen reaktioaika riippuu värin erityisestä optimaalisesta ajasta. On ehdotettu, että CCK-8: n optimaalinen solumäärä ja inkubointiaika tulisi tutkia ennen kokeita CCK-8: lla.
Tämän pakkauksen havaitseminen riippuu dehydrogenaasikatalysoiduista reaktioista, joten pelkistimet (kuten jotkut antioksidantit) voivat häiritä havaitsemista. Jos järjestelmässä on enemmän havaittavia pelkistimiä, yritä poistaa ne.
Turvallisuutesi ja terveytesi vuoksi käytä laboratoriotakkia ja kertakäyttökäsineitä ennen kokeita.
Tuote sisältää
Määrä (laskurin kanssa)
Ratkaisun väri
BrdU
1 x 150 ui
Korjaava / denaturoiva ratkaisu
2 x 25 ml
BrdU-hiiren tunnistus mAb
1 x 500 ui
Vihreä
Hiiren vastainen IgG, HRP-sidottu vasta-aine
1 x 500 ui
Punainen
Detection Antibody Diluent
1 x 50 ml
Vihreä
HRP-laimennin
1 x 50 ml
Punainen
20X pesupuskuri
1 x 50 ml
TMB-substraatti 7004
1 x 50 ml
PYSÄYTÄ ratkaisu 7002
2 x 25 ml
Cell Proliferation Assay Kit
Tuotteen yleiskatsaus
BrDU-soluproliferaation ELISA-pakki (ab126556) on epäsuora ELISA-paketti BrdU: n inkorporaation havaitsemiseen aktiivisesti lisääntyvien solujen vasta syntetisoituun DNA: han . Siihen sisältyy BrdU: n liittäminen soluihin, joita on viljelty mikrotiitterilevyillä käyttäen solukerrosta kiinteänä faasina. Viimeisen 2 – 24 tunnin viljelyn aikana BrdU lisätään mikrotiitterilevyn kuoppiin. BrdU sisällytetään jakautuvien solujen DNA: han. Jotta vasta-aineen sitoutuminen sisällytetty BrdU-solut on vahvistettava, permeabilisoitiin ja DNA denaturoidaan. Tämä kaikki tehdään yhdessä vaiheessa käsittelemällä Fixing Solution -liuoksella. Detektorin anti-BrdU-monoklonaalinen vasta-aine pipetoidaan kuoppiin ja annetaan inkuboitua tunnin ajan, jona aikana se sitoutuu mihin tahansa liitettyyn BrdU: han. Sitoutumaton vasta-aine pestään pois ja lisätään piparjuuriperoksidaasiin konjugoitua vuohen hiiren vastaista vasta-ainetta, joka sitoutuu detektorivasta-aineeseen.
Piparjuuriperoksidaasi katalysoi kromogeenisen substraatin tetra-metyylibentsidiinin (TMB) muuttumisen värittömästä liuoksesta siniseksi (tai keltaiseksi lopetusreagenssin lisäämisen jälkeen), jonka intensiteetti on verrannollinen soluissa olevan BrdU: n määrään. . Värillinen reaktiotuote kvantifioidaan käyttämällä spektrofotometriä.
Tuloksena oleva määritys on herkkä, nopea, helppo suorittaa ja soveltuu suurelle näytteelle . Soluproliferaation arvioinnin lisäksi tietoja, kuten solujen lukumäärä, morfologia ja soluantigeenien analyysi, voidaan saada yhdestä viljelmästä.
Huomautuksia
Abcam ei ole hakenut eikä aio hakea REACH-lupaa asiakkaille, jotka käyttävät tuotteita, jotka sisältävät eurooppalaisten lupien luetteloa (liite XIV) aineita. Asiakkaidemme vastuulla on tarkistaa, onko REACH-lupaa ja muita asiaankuuluvia valtuutuksia sovellettava käyttötarkoituksiinsa.
CytoSelect MTT Cell Proliferation Assay
CBA-252
960 assays
EUR 490.8
Description: Cell Biolabs? CytoSelect MTT Cell Proliferation Assay provides a colorimetric format for measuring and monitoring cell proliferation. The kit contains sufficient reagents for the evaluation of 960 assays in 96-well plates or 192 assays in 24-well plates. Cells can be plated and then treated with compounds or agents that affect proliferation. Cells are then detected with the proliferation reagent, which is converted in live cells from the yellow tetrazole MTT to the purple formazan form by a cellular reductase (Figure 1). An increase in cell proliferation is accompanied by an increased signal, while a decrease in cell proliferation (and signal) can indicate the toxic effects of compounds or suboptimal culture conditions. The assay principles are basic and can be applied to most eukaryotic cell lines, including adherent and non-adherent cells and certain tissues. This cell proliferation reagent can be used to detect proliferation in bacteria, yeast, fungi, protozoa as well as cultured mammalian and piscine cells.
Description: Cell Biolabs? CytoSelect Cell Proliferation Assay Reagent (Fluorometric) provides a fluorometric format for measuring and monitoring cell proliferation. Cells can be plated and then treated with compounds or agents that affect proliferation. Cells are then incubated with the proliferation reagent. Upon entering metabolically active live cells, the non-fluorescent proliferation reagent is converted into a bright red fluorescent form. An increase in cell proliferation is accompanied by increased fluorescent signal, while a decrease in cell proliferation (and signal) can indicate the toxic effects of compounds or suboptimal culture conditions. The assay principles are basic and can be applied to most eukaryotic cell lines, including adherent and non-adherent cells and certain tissues. This cell proliferation reagent can be used to detect proliferation in bacteria, yeast, fungi, protozoa as well as cultured mammalian and piscine cells. The kit contains sufficient reagents for the evaluation of 960 assays in ten 96-well plates or 192 assays in eight 24-well plates.
Description: Cell Biolabs? CytoSelect WST-1 Cell Proliferation Assay Reagent provides a colorimetric format for measuring and monitoring cell proliferation. The 10 mL volume is sufficient for the evaluation of 960 assays in ten 96-well plates or 192 assays in eight 24-well plates. Cells can be plated and then treated with compounds or agents that affect proliferation. Cells are then detected with the proliferation reagent, which is converted in live cells from WST-1 to the formazan form in the presence of cellular NADH and an electron mediator. An increase in cell proliferation is accompanied by increased signal, while a decrease in cell proliferation (and signal) can indicate the toxic effects of compounds or suboptimal culture conditions. The assay principles are basic and can be applied to most eukaryotic cell lines, including adherent and non-adherent cells and certain tissues. This cell proliferation reagent can be used to detect proliferation in bacteria, yeast, fungi, protozoa as well as cultured mammalian and piscine cells.
Cell Proliferation Assay Kit
55R-1363
500 assays
EUR 457.2
Description: Assay Kit for detection of Cell Proliferation in the research laboratory
Cell Proliferation Assay Kit
55R-1364
500 assays
EUR 457.2
Description: Assay Kit for detection of Cell Proliferation in the research laboratory
BrdU Cell Proliferation Assay Kit
C0300-050
500 Assays
EUR 1113.6
BrdU Cell Proliferation Assay Kit
C0300-100
1000 Assays
EUR 1574.4
BrdU Cell Proliferation Assay Kit
C0300-500
5000 Assays
EUR 5325.6
BrdU Cell Proliferation Assay Kit
K306-1000
each
EUR 1168.8
BrdU Cell Proliferation Assay Kit
K306-200
each
EUR 470.4
Cell Meterâ„¢ Cell Proliferation Assay Kit
22505-200Tests
200 Tests
EUR 199
Description: Cell Meterâ„¢ Cell Proliferation Assay Kit is a sensitive fluorescence-based method for quantifying cells and assessing cell proliferation and cytotoxicity in a microplate format.
Cell Proliferation Assay Kit, WST-1
C0200-025
250 Assays
EUR 262.8
Cell Proliferation Assay Kit, WST-1
C0200-050
500 Assays
EUR 375.6
Cell Proliferation Assay Kit, WST-1
C0200-100
1000 Assays
EUR 562.8
Cell Proliferation Assay Kit (Fluorometric)
K307-1000
each
EUR 489.6
CellCount-Blue Cell Proliferation Assay Kit
C0100-025
250 Assays
EUR 133.2
CellCount-Blue Cell Proliferation Assay Kit
C0100-050
500 Assays
EUR 160.8
CellCount-Blue Cell Proliferation Assay Kit
C0100-100
1000 Assays
EUR 225.6
CellCount-Blue Cell Proliferation Assay Kit
C0100-500
5000 Assays
EUR 639.6
CytoSelect BrdU Cell Proliferation ELISA Kit
CBA-251
96 assays
EUR 637.2
Description: The CytoSelect BrdU Cell Proliferation ELISA Kit detects BrdU incorporated into cellular DNA during cell proliferation using an anti-BrdU antibody. When cells are incubated in media containing BrdU, the pyrimidine analog is incorporated in place of thymidine into the newly synthesized DNA of proliferating cells. Once the labeling media is removed, the cells are fixed and the DNA is denatured in one step with a fix/denature solution (denaturation of the DNA is necessary to improve the accessibility of the incorporated BrdU for detection). Then an anti-BrdU mouse monoclonal antibody is added followed by an HRP conjugated secondary antibody to detect the incorporated BrdU. The magnitude of the absorbance for the developed color is proportional to the quantity of BrdU incorporated into cells and can be directly correlated to cell proliferation.
