Capilia TB-Neo

 Analyysi: uusi työkalu tuberkuloosin ja ei-tuberkuloosin mykobakteerien nopeaan erottamiseen

Abstrakti

Asetus:  Kyky erottaa nopeasti Mycobacterium tuberculosis -kompleksi (MTC) ja ei-tuberkuloosiset mykobakteerit (NTM) ovat kriittisiä kliinisessä käytännössä.

Tavoite:  Arvioida immunokromatografisen (IC) määrityksen hyödyllisyys MTC: n ja NTM: n erottamiseksi.

Suunnittelu:  Analysoimme paneelin, jossa oli 145 viljelmää 128 potilaalta. Vertailumenetelminä käytettiin rutiininomaisia ​​molekyylitunnistusmenetelmiä, kuten AccuProbe Mycobacterium tuberculosis -kompleksiviljelmän tunnistustesti ja GenoType Mycobacterium -määritykset.

Tulokset:  101 positiivisesta viljelmästä 98 tunnistettiin oikein käyttämällä Capilia ™ TB-Neo -määritystä. Kolmesta ristiriitaisesta isolaatista yksi tunnistettiin M. bovis bacille Calmette-Guériniksi (BCG) ja kaksi M. tuberculosisiksi. Vaikka emme ole suorittaneet näiden kantojen sekvensointia, joitain vääriä negatiivisia tuloksia on kuvattu mpb64-geenin mutaatioiden tai joidenkin M. Bovis BCG -kantojen vuoksi. Emme havainneet vääriä positiivisia tuloksia tai ristireaktioita 22 NTM-kannan, 12 ei-mykobakteerimikro-organismin ja 10 negatiivisen viljelmän kanssa.

Johtopäätös:  Raportoimme tämän yleisen suorituskyvyn (herkkyys 97%, spesifisyys 100%, positiivinen ennustearvo 100% ja negatiivinen ennustearvo 96%) tämän nopean määrityksen, joka on helppo suorittaa ja tulkita eikä vaadi näytteen valmistelua, koulutetut teknikot tai kalliita laitteita.

TEKSTI
Capilia TB -analyysi on nopea, yksinkertainen ja halpa tunnistustesti laajasti (1–7) arvioitujen mykobakteeriviljelyisolaattien tunnistamiseksi. Tämän määrityksen uusi sukupolvi, Capilia TB-Neo -määritys (Capilia), on kehitetty korvaamaan alkuperäinen määritys (Y. Namba, 8. syyskuuta 2010, eurooppalainen patenttihakemus EP 2226635 A1). Alkuperäisen määrityksen herkkyyden ja spesifisyyden on osoitettu vaihtelevan välillä 92% – 100% (1, 2, 6). Ristireaktio muiden mykobakteerien ja muiden bakteerien kanssa on osoitettu alkuperäisellä määrityksellä (1, 7; Y. Namba, 8. syyskuuta 2010, eurooppalainen patenttihakemus EP 2226635 A1).

Tuloksena kehitettiin uusi määritys korvaamaan alkuperäinen määritys ristireaktion hoitamiseksi ja spesifisyyden parantamiseksi (Y. Namba, 8. syyskuuta 2010, eurooppalainen patenttihakemus EP 2226635 A1). Toistaiseksi on vain kaksi julkaistua tutkimusta, jotka ovat arvioineet tätä seuraavan sukupolven määritystä, ja tutkimukset osoittavat ristiriitaisia ​​tuloksia. Gomathi et ai. Havaitsivat yleisen herkkyyden ja spesifisyyden vähenemisen. (8) – vastaavasti 76% ja 86%. Pokam et ai. raportoivat herkkyyden ja spesifisyyden lähestyvän 100%, mikä on verrattavissa alkuperäisen esseen (9) vastaavuuteen.

Tutkimus tehtiin käynnissä olevan tutkimuksen isolaateilla, joissa arvioidaan GeneXpert MTB / RIF -testin (Xpert) käyttöä Lusakassa, Sambiassa. Yskenäytteet kerättiin epäiltyistä tuberkuloosista (TB) ja vahvistetuista tuberkuloosipotilaista, jotka osallistuivat rutiinipalveluihin ja joille Xpert havaitsi tuberkuloosia tai tuberkuloosia rifampiiniresistenssillä, ja 10 prosentista niistä, joille Xpert ei havainnut tuberkuloosia, laadunvarmistamiseksi, rifampiiniresistenssin vahvistamiseksi, ja hoidon seurantatarkoituksiin. Tutkimuksella oli eettinen hyväksyntä Sambian yliopiston eettisen komitean toimesta, ja kaikki potilaat antoivat kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen ennen yskösnäytteiden toimittamista mykobakteeriviljelmään.

Arviointiprotokolla
Jokainen kolmesta testistä tehdään kunkin valmistajan
ohjeiden mukaisesti seuraavien määrittämiseksi.
1. Herkkyys M. tuberculosis -havaitsemiseksi MGIT-viljelmillä
a. Kukin paikka ympää 25 erilaista MTB-potilaskantaa MGIT-putkiin ja
lataa ne BACTEC MGIT 960 -laitteeseen
b. Kukin paikka testaa positiiviset viljelmät käyttämällä kolmea määritystä ensimmäisenä päivänä, jolloin
viljelmät signaalivat positiivisena
c. Lue ja kirjaa testitulokset tarkkaan ajankohtaan, joka on suositeltavaa kussakin testipakkauslehdessä
(15 min), ja lukea uudelleen 30 minuutin ja 60 minuutin kohdalla (päivä 1 ja päivä 3
klo 15, 30 ja 60 min)
d. Tallenna kaistan voimakkuus sekä testi- että vertailulinjoille (“negatiivinen” (-),
“Erittäin heikko” (+/-), “heikko” (+), “keskitaso” (++) ja “vahva” (+++).
e. Viljelmiä, joiden testitulos on negatiivinen, inkuboidaan uudelleen 36 ° C: n inkubaattorissa
vielä 48 tuntia ennen uudelleentestausta.

2. Herkkyys M. tuberculosis -havaitsemiseksi LJ-viljelmillä
a. Kukin paikka inokuloi 20 erilaista potilaskantaa MTB-kantoja LJ-alustalle
ja inkuboi 36 ° C: ssa näkyvien pesäkkeiden ilmaantumiseen.
b. Valmista jokaisen kannan suspensio, joka vastaa MacFarlandin sameusstandardia
1.0, kuhunkin testipakkaukseen sisältyvään puskuriin.
c. Valmistetaan laimennukset jokaisesta 1,0 MacFarland-standardisuspensiosta
määrityspuskurissa arvoon 1:10 ja 1: 100.
d. Testaa jokaisen MTB-kannassuspension kaikki kolme laimennosta käyttämällä kutakin
kolmea immunomääritystä
e. Lue ja kirjaa testitulokset tarkkaan ajankohtaan, joka on suositeltavaa kussakin testipakkauslehdessä
(15 min), ja lukea uudelleen 30 minuutin ja 60 minuutin kohdalla (jokaisella laimennuksella:
1,0, 1/10 ja 1/100)
f. Tallenna kaistan voimakkuus sekä testi- että kontrollilinjoille (”negatiivinen” (-),
“hyvin heikko” (+/-), “heikko” (+), “keskitaso” (++) ja “vahva” (+) ++).

Päätelmät :
• Kaikki kolme testiä osoittivat 100% herkkyyden M-tuberkuloosin havaitsemiseksi
MGIT: stä positiivisuuspäivänä.
• Kahden kiinteässä viljelmässä käytettäväksi osoitetun testin (Capilia TB NEO
ja SD TB Ag MPT64 -pikatesti) herkkyys oli 100% M. tuberculosis -bakteerin havaitsemiseksi
LJ-viljelmillä kasvatetuista isolaateista, kun ne suoritettiin pakkausselosteiden mukaisesti.
BD MGIT TBc Tunnistaminen Testi ei ole tarkoitettu käytettäväksi kiinteän mediakulttuureissa
ja näytti vähentyneen herkkyyden, kun niitä testattiin LJ-kantojen menettelyä

käytetään tässä tutkimuksessa.
• Capilia TB Neo ja BD MGIT ID -testi eivät antaneet vääriä positiivisia tuloksia
minkään testatun NTM: n kanssa (spesifisyys 100%). SD Bioline TB Ag MPT64 antoi heikot vääriä positiivisia tuloksia kahdella M. mahakannalla yhdessä neljästä tutkimuskohteesta. •
Testien toiminnalliset ominaisuudet olivat samanlaiset. Teknologit pitivät
Capilia TB Neo -määritystä helpommin luettavana johtuen testikaistan vahvemmasta kaistan voimakkuudesta
verrattuna kahteen muuhun määritykseen. SD TB Ag MPT64 -pikatesti osoitti taustatekijöitä, jotka estävät testin tulkintaa, jos se luetaan 30 minuutin kuluttua, vaikka valmistajan ohjeet sallivat sen. BD MGIT ID -testiä ei ole valmistettu käytettäväksi kiinteiden viljelmien isolaattien kanssa.

Yhteenvetona voidaan todeta, että nyt on olemassa kolme kaupallisesti tuotettua pikatestiä, jotka mahdollistavat
M. tuberculosisin erittäin herkän tunnistamisen positiivisista MGIT-viljelmistä. Kaksi näistä valmistetaan myös käytettäväksi kiinteiden viljelmien isolaattien kanssa ja niiden
suorituskyky on hyvä . Kaikki kolme määritystä osoittavat hyväksyttävän yleisen herkkyyden, spesifisyyden ja
helppokäyttöisyyden. SD-määritys osoitti enemmän taustaväriä pitkittyneillä
lukuaikoilla ja se voi reagoida ristireaktiossa M. gastrin kanssa, ja BD MGIT ID -testi osoitti jonkin verran heikompia testivyöhykkeitä, jolloin tuloksista tuli vähemmän ilmeisiä.

 

CMV-TetR (Neo) Lentiviral particles 

LVP017-Neo 1x107 IFU/ml x 200ul
EUR 484.8
Description: Pre-made lentiviral particles expressing tetracycline regulator protein (TetR) under CMV promoter, with Neomycin antibiotic marker.

β-Lactamase (Neo) lentiviral particles

LVP335-Neo 1x107 IFU/ml x 200ul
EUR 418.8
Description: pre-made lentiviral particles expressing β-Lactamase gene. A Neomycin marker was expressed under RSV promoter. Particles is provided in DMEM medium with 10% FBS and 60ug/ml of polybrene.

EF1a-TetR (Neo) Lentiviral particles 

LVP459-Neo 1x107 IFU/ml x 200ul
EUR 484.8
Description: Pre-made lentiviral particles expressing tetracycline regulator protein (TetR) under enhanced EF1a promoter with Neomycin antibioic marker.

LoxP GFP/RFP ColorSwitch (Neo) lentivirus

LVP460-Neo 1x107 IFU/ml x 200ul
EUR 852
Description: Pre-made lentiviral particles expressing "LoxP-GFP-stop-LoxP-RFP-Stop" cassette under suCMV promoter. It also contains a Neomycin antibiotic selection marker under Rsv promoter. Virus is provided in DMEM medium with 10% FBS and 60ug/ml of polybrene.

Rapid Bovine TB Ab Test Kit

RB23-02-DD 1 box
EUR 154.08
Description: Please check the datasheet of Rapid Bovine TB Ab Test Kit before using the test.

pWZL-Neo Retroviral Vector

RTV-001-NEO 10 ?g
EUR 679.2
Description: Use this construct to clone your gene for downstream recombinant retroviral packaging

SV40 large T-antigen (Neo), CMV lentiviral particles

LVP016-Neo 1x107 IFU/ml x 200ul
EUR 418.8
Description: Pre-made lentiviral particles expressing SV40 large T-antigen under suCMV promoter, containing Neomycin marker.

SV40 large T-antigen (Neo), EF1a lentiviral particles

LVP557-Neo 1x107 IFU/ml x 200ul
EUR 418.8
Description: Pre-made lentiviral particles expressing SV40 large T-antigen under EF1a promoter, containing Neomycin marker.

TB (Mycobacterium Tuberculosis Antibody IgG) ELISA test

38 96T/Box Ask for price
Description: ELISA based test for quantitative detection of TB (Mycobacterium Tuberculosis Antibody IgG)

TB (Mycobacterium Tuberculosis Antibody IgM) ELISA test

39 96T/Box Ask for price
Description: ELISA based test for quantitative detection of TB (Mycobacterium Tuberculosis Antibody IgM)

Ag Rapid Bov. TB Ab Test Kit

RB23-02 1 box
EUR 174
Description: Please check the datasheet of Ag Rapid Bov. TB Ab Test Kit before using the test.

CMV Control lentiviral particles (Neo)

CMV-Null-Neo 1 x107 IFU/ml x 200ul
EUR 418.8
Description: Negative control lentivirus contains a null spacer insert under CMV promoter, serves as the negative control of lentivurs treatment for the specificity of any target expression effects. It also has the Neomycin marker under RSV promoter.

EF1a Control lentiviral particles (Neo)

EF1a-Null-Neo 1 x107 IFU/ml x 200ul
EUR 418.8
Description: Negative control lentivirus contains a null spacer insert under EF1a promoter, serves as the negative control of lentivurs treatment for the specificity of any target expression effects. It also has the Neomycin marker under RSV promoter.

hTERT (CMV, Neo) lentivirus in PBS

LVP1130-Neo-PBS 1x108 IFU/ml x 200ul
EUR 852
Description: Concentrated lentivirus in PBS, expressing human TERT gene under suCMV promoter, containing Neomycin marker.

hTERT (EF1a, Neo) lentivirus in PBS

LVP1131-Neo-PBS 1x108 IFU/ml x 200ul
EUR 852
Description: Concentrated lentivirus in PBS, expressing human TERT gene under EF1a promoter, containing Neomycin marker.

rtTA (Neo) in PBS, Lentiviral particles

LVP400-Neo-PBS 5x107 IFU/ml x 200ul
EUR 608.4
Description: Pre-made lentiviral particles expressing reverse tetracycline Transcriptional Activator (rtTA) under enhanced EF1a promoter with Neomycin antibioic marker, concentrated particles provided in PBS solution.

Color Switch, CRE report cell line: HEK293-loxP-GFP-RFP Neo)

SC018-Neo 2x10E6 cell/ml x1ml
EUR 5280
Description: CRE reporter cell line (Neo): HEK293 cell line expressing "LoxP-GFP-stop-LoxP-RFP" cassette with Neomycin antibiotic marker

CMV-TetR (Neo) Lentiviral particles  in PBS

LVP017-Neo-PBS 5x107 IFU/ml x 200ul
EUR 608.4
Description: Pre-made lentiviral particles expressing tetracycline regulator protein (TetR) under CMV promoter, with Neomycin antibiotic marker. Particles pellet was re-suspended in PBS solution.

EF1a-TetR (Neo) Lentiviral particles  in PBS

LVP459-Neo-PBS 5x107 IFU/ml x 200ul
EUR 608.4
Description: Pre-made lentiviral particles expressing tetracycline regulator protein (TetR) under enhanced EF1a promoter with Neomycin antibioic marker. Particles was pellet down and re-suspended in PBS solution.

LoxP GFP/RFP ColorSwitch (Neo) lentivirus (concentrated)

LVP460-Neo-PBS 5x107 IFU/ml x 200ul
EUR 1034.4
Description: Pre-made lentiviral particles expressing "LoxP-GFP-stop-LoxP-RFP-Stop" cassette under suCMV promoter. It also contains a Neomycin antibiotic selection marker under Rsv promoter. Virus was provied in PBS solution.

NATtrol Zika Virus Stock (Qualitative) (1 mL)

TEST 1 mL
EUR 1327.97
Description: Please contact Gentaur in order to receive the datasheet of the product.

TB-16&TB-38

E61H01302 100ug
EUR 411.6

SV40 large T-antigen (Neo) in PBS, CMV lentiviral particles

LVP016-Neo-PBS 5x107 IFU/ml x 200ul
EUR 852
Description: Pre-made lentiviral particles expressing SV40 large T-antigen under suCMV promoter, containing Neomycin marker, provided in PBS solution.

SV40 large T-antigen (Neo) in PBS, EF1a lentiviral particles

LVP557-Neo-PBS 5x107 IFU/ml x 200ul
EUR 852
Description: Pre-made lentiviral particles expressing SV40 large T-antigen under EF1a promoter, containing Neomycin marker, provided in PBS solution.

CMV Control lentiviral particles (Neo) in PBS

CMV-Null-Neo-PBS 1 x108 IFU/ml x 200ul
EUR 852
Description: Negative control lentivirus contains a null spacer insert under CMV promoter, serves as the negative control of lentivurs treatment for the specificity of any target expression effects. It also has the Neomycin marker under RSV promoter. The virus was concentrated and provided in PBS solution.

EF1a Control lentiviral particles (Neo) in PBS

EF1a-Null-Neo-PBS 1 x108 IFU/ml x 200ul
EUR 852
Description: Negative control lentivirus contains a null spacer insert under EF1a promoter, serves as the negative control of lentivurs treatment for the specificity of any target expression effects. It also has the Neomycin marker under RSV promoter. The virus was concentrated and provided in PBS solution.

TB-16&TB-38 & ESAT

E61H01303 100ug
EUR 411.6

TB Dry

A2536-1000000 1 kg
EUR 351.6
Description: TB Dry is a single component high nutrient medium formulatedto maximize yields of recombinant plasmids and cosmids.The most important advantage of TB DRY is that all componentsare combined into a single powder, eliminating the need to autoclave two separate solutions.

Jätä kommentti