Analyysi: uusi työkalu tuberkuloosin ja ei-tuberkuloosin mykobakteerien nopeaan erottamiseen

Abstrakti

TEKSTI
Capilia TB -analyysi on nopea, yksinkertainen ja halpa tunnistustesti laajasti (1–7) arvioitujen mykobakteeriviljelyisolaattien tunnistamiseksi. Tämän määrityksen uusi sukupolvi, Capilia TB-Neo -määritys (Capilia), on kehitetty korvaamaan alkuperäinen määritys (Y. Namba, 8. syyskuuta 2010, eurooppalainen patenttihakemus EP 2226635 A1). Alkuperäisen määrityksen herkkyyden ja spesifisyyden on osoitettu vaihtelevan välillä 92% – 100% (1, 2, 6). Ristireaktio muiden mykobakteerien ja muiden bakteerien kanssa on osoitettu alkuperäisellä määrityksellä (1, 7; Y. Namba, 8. syyskuuta 2010, eurooppalainen patenttihakemus EP 2226635 A1).

Tuloksena kehitettiin uusi määritys korvaamaan alkuperäinen määritys ristireaktion hoitamiseksi ja spesifisyyden parantamiseksi (Y. Namba, 8. syyskuuta 2010, eurooppalainen patenttihakemus EP 2226635 A1). Toistaiseksi on vain kaksi julkaistua tutkimusta, jotka ovat arvioineet tätä seuraavan sukupolven määritystä, ja tutkimukset osoittavat ristiriitaisia ​​tuloksia. Gomathi et ai. Havaitsivat yleisen herkkyyden ja spesifisyyden vähenemisen. (8) – vastaavasti 76% ja 86%. Pokam et ai. raportoivat herkkyyden ja spesifisyyden lähestyvän 100%, mikä on verrattavissa alkuperäisen esseen (9) vastaavuuteen.

Tutkimus tehtiin käynnissä olevan tutkimuksen isolaateilla, joissa arvioidaan GeneXpert MTB / RIF -testin (Xpert) käyttöä Lusakassa, Sambiassa. Yskenäytteet kerättiin epäiltyistä tuberkuloosista (TB) ja vahvistetuista tuberkuloosipotilaista, jotka osallistuivat rutiinipalveluihin ja joille Xpert havaitsi tuberkuloosia tai tuberkuloosia rifampiiniresistenssillä, ja 10 prosentista niistä, joille Xpert ei havainnut tuberkuloosia, laadunvarmistamiseksi, rifampiiniresistenssin vahvistamiseksi, ja hoidon seurantatarkoituksiin. Tutkimuksella oli eettinen hyväksyntä Sambian yliopiston eettisen komitean toimesta, ja kaikki potilaat antoivat kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen ennen yskösnäytteiden toimittamista mykobakteeriviljelmään.

Arviointiprotokolla
Jokainen kolmesta testistä tehdään kunkin valmistajan
ohjeiden mukaisesti seuraavien määrittämiseksi.
1. Herkkyys M. tuberculosis -havaitsemiseksi MGIT-viljelmillä
a. Kukin paikka ympää 25 erilaista MTB-potilaskantaa MGIT-putkiin ja
lataa ne BACTEC MGIT 960 -laitteeseen
b. Kukin paikka testaa positiiviset viljelmät käyttämällä kolmea määritystä ensimmäisenä päivänä, jolloin
viljelmät signaalivat positiivisena
c. Lue ja kirjaa testitulokset tarkkaan ajankohtaan, joka on suositeltavaa kussakin testipakkauslehdessä
(15 min), ja lukea uudelleen 30 minuutin ja 60 minuutin kohdalla (päivä 1 ja päivä 3
klo 15, 30 ja 60 min)
d. Tallenna kaistan voimakkuus sekä testi- että vertailulinjoille (“negatiivinen” (-),
“Erittäin heikko” (+/-), “heikko” (+), “keskitaso” (++) ja “vahva” (+++).
e. Viljelmiä, joiden testitulos on negatiivinen, inkuboidaan uudelleen 36 ° C: n inkubaattorissa
vielä 48 tuntia ennen uudelleentestausta.

2. Herkkyys M. tuberculosis -havaitsemiseksi LJ-viljelmillä
a. Kukin paikka inokuloi 20 erilaista potilaskantaa MTB-kantoja LJ-alustalle
ja inkuboi 36 ° C: ssa näkyvien pesäkkeiden ilmaantumiseen.
b. Valmista jokaisen kannan suspensio, joka vastaa MacFarlandin sameusstandardia
1.0, kuhunkin testipakkaukseen sisältyvään puskuriin.
c. Valmistetaan laimennukset jokaisesta 1,0 MacFarland-standardisuspensiosta
määrityspuskurissa arvoon 1:10 ja 1: 100.
d. Testaa jokaisen MTB-kannassuspension kaikki kolme laimennosta käyttämällä kutakin
kolmea immunomääritystä
e. Lue ja kirjaa testitulokset tarkkaan ajankohtaan, joka on suositeltavaa kussakin testipakkauslehdessä
(15 min), ja lukea uudelleen 30 minuutin ja 60 minuutin kohdalla (jokaisella laimennuksella:
1,0, 1/10 ja 1/100)
f. Tallenna kaistan voimakkuus sekä testi- että kontrollilinjoille (”negatiivinen” (-),
“hyvin heikko” (+/-), “heikko” (+), “keskitaso” (++) ja “vahva” (+) ++).

Päätelmät :
• Kaikki kolme testiä osoittivat 100% herkkyyden M-tuberkuloosin havaitsemiseksi
MGIT: stä positiivisuuspäivänä.
• Kahden kiinteässä viljelmässä käytettäväksi osoitetun testin (Capilia TB NEO
ja SD TB Ag MPT64 -pikatesti) herkkyys oli 100% M. tuberculosis -bakteerin havaitsemiseksi
LJ-viljelmillä kasvatetuista isolaateista, kun ne suoritettiin pakkausselosteiden mukaisesti.
BD MGIT TBc Tunnistaminen Testi ei ole tarkoitettu käytettäväksi kiinteän mediakulttuureissa
ja näytti vähentyneen herkkyyden, kun niitä testattiin LJ-kantojen menettelyä

käytetään tässä tutkimuksessa.
• Capilia TB Neo ja BD MGIT ID -testi eivät antaneet vääriä positiivisia tuloksia
minkään testatun NTM: n kanssa (spesifisyys 100%). SD Bioline TB Ag MPT64 antoi heikot vääriä positiivisia tuloksia kahdella M. mahakannalla yhdessä neljästä tutkimuskohteesta. •
Testien toiminnalliset ominaisuudet olivat samanlaiset. Teknologit pitivät
Capilia TB Neo -määritystä helpommin luettavana johtuen testikaistan vahvemmasta kaistan voimakkuudesta
verrattuna kahteen muuhun määritykseen. SD TB Ag MPT64 -pikatesti osoitti taustatekijöitä, jotka estävät testin tulkintaa, jos se luetaan 30 minuutin kuluttua, vaikka valmistajan ohjeet sallivat sen. BD MGIT ID -testiä ei ole valmistettu käytettäväksi kiinteiden viljelmien isolaattien kanssa.

Yhteenvetona voidaan todeta, että nyt on olemassa kolme kaupallisesti tuotettua pikatestiä, jotka mahdollistavat
M. tuberculosisin erittäin herkän tunnistamisen positiivisista MGIT-viljelmistä. Kaksi näistä valmistetaan myös käytettäväksi kiinteiden viljelmien isolaattien kanssa ja niiden
suorituskyky on hyvä . Kaikki kolme määritystä osoittavat hyväksyttävän yleisen herkkyyden, spesifisyyden ja
helppokäyttöisyyden. SD-määritys osoitti enemmän taustaväriä pitkittyneillä
lukuaikoilla ja se voi reagoida ristireaktiossa M. gastrin kanssa, ja BD MGIT ID -testi osoitti jonkin verran heikompia testivyöhykkeitä, jolloin tuloksista tuli vähemmän ilmeisiä.

 

HIV 1/2 Ab Test including sub type O. POCT (Lancet, Capillary tube, Alcohol swab Incld.)
03FK13	Abbott	1 tests/kit	EUR 60.5

TB (Mycobacterium Tuberculosis Antibody IgG) ELISA test
38	Biobase	96T/Box	Ask for price
Description: ELISA based test for quantitative detection of TB (Mycobacterium Tuberculosis Antibody IgG)

TB (Mycobacterium Tuberculosis Antibody IgM) ELISA test
39	Biobase	96T/Box	Ask for price
Description: ELISA based test for quantitative detection of TB (Mycobacterium Tuberculosis Antibody IgM)

Malaria Differential P.f/Pan Ag Test (HRP II+ pLDH) POCT (Lancet, Capillary tube, Alcohol swab Incld.)
05FK63	Abbott	1 tests/kit	EUR 148.5

Recombinant human Protein capicua homolog
P2894	FN Test	100ug	Ask for price
Description: Recombinant protein for human Protein capicua homolog

Human TES(Testin) ELISA Kit
EH1738	FN Test	96T	EUR 681.12
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Homo sapiens;Sensitivity: 0.375 ng/ml

COVID-19 RNA Test, 1 test/pack
U20250	USTAR Biotechnologies (Hangzhou)	test	Ask for price

T(Testosterone) ELISA Kit
EU0400	FN Test	96T	EUR 571.5
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: General;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Rat T(Testosterone) ELISA Kit
ER1462	FN Test	96T	EUR 628.92
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Rattus;Sensitivity: 0.188 ng/ml

HBsAg Test Card (Test in Whole Blood)
HBsAg-214	Innovation Biotech	4.0mm (strip in a card) 25cards/box	EUR 0.2

Recombinant human Testin
P2531	FN Test	100ug	Ask for price
Description: Recombinant protein for human Testin

HBsAg Test Strip (Test in Whole Blood)
HBsAg-213	Innovation Biotech	3.0mm (single pouch) 100pouches/box	EUR 0.1

Mouse Testosterone ELISA Kit
EM1850	FN Test	96T	EUR 628.92
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Mus ;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Human Testosterone ELISA Kit
EH4850	FN Test	96T	EUR 628.92
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Homo sapiens ;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Human SPOCK2(Testican-2) ELISA Kit
EH2271	FN Test	96T	EUR 681.12
Description: Method of detection: Double Antibody, Sandwich ELISA;Reacts with: Homo sapiens;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Bovine T(Testosterone) ELISA Kit
EB0049	FN Test	96T	EUR 681.12
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Cattle;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Recombinant human Testican-2
P1475	FN Test	100ug	Ask for price
Description: Recombinant protein for human Testican-2

Test product
testttt	National Diagnostics	0	Ask for price

Human F-TESTO(Free Testoterone) ELISA Kit
EH3092	FN Test	96T	EUR 571.5
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Homo sapiens;Sensitivity: 9.375pg/ml

Human TEX101(testis expressed 101) ELISA Kit
EH12903	FN Test	96T	EUR 681.12
Description: Method of detection: Double Antibody, Sandwich ELISA;Reacts with: Homo sapiens ;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Magenta 2-Way Test Tube Cap
30930012-1	Bio-WORLD	100 Unit(s)	EUR 41.48

Magenta 2-Way Test Tube Cap
30930012-2	Bio-WORLD	500 Unit(s)	EUR 124.45

Magenta 2-Way Test Tube Cap
30930012-3	Bio-WORLD	1000 Unit(s)	EUR 207.42

TESTO (Testosterone) ELISA test
19	Biobase	96T/Box	Ask for price
Description: ELISA based test for quantitative detection of O (osterone)

Chloride Test 70-1000
WAT3613	Scientific Laboratory Supplies	EACH	EUR 140.4

Recombinant human Testis-specific Y-encoded-like protein 5
P1359	FN Test	100ug	Ask for price
Description: Recombinant protein for human Testis-specific Y-encoded-like protein 5

AFP Test Card
INV-1112	Innovation Biotech	4.0mm (strip in a card) 25cards/box	EUR 0.44

PSA Test Card
INV-1122	Innovation Biotech	4.0mm (strip in a card) 25cards/box	EUR 0.52