Analyysi: uusi työkalu tuberkuloosin ja ei-tuberkuloosin mykobakteerien nopeaan erottamiseen

Abstrakti

TEKSTI
Capilia TB -analyysi on nopea, yksinkertainen ja halpa tunnistustesti laajasti (1–7) arvioitujen mykobakteeriviljelyisolaattien tunnistamiseksi. Tämän määrityksen uusi sukupolvi, Capilia TB-Neo -määritys (Capilia), on kehitetty korvaamaan alkuperäinen määritys (Y. Namba, 8. syyskuuta 2010, eurooppalainen patenttihakemus EP 2226635 A1). Alkuperäisen määrityksen herkkyyden ja spesifisyyden on osoitettu vaihtelevan välillä 92% – 100% (1, 2, 6). Ristireaktio muiden mykobakteerien ja muiden bakteerien kanssa on osoitettu alkuperäisellä määrityksellä (1, 7; Y. Namba, 8. syyskuuta 2010, eurooppalainen patenttihakemus EP 2226635 A1).

Tuloksena kehitettiin uusi määritys korvaamaan alkuperäinen määritys ristireaktion hoitamiseksi ja spesifisyyden parantamiseksi (Y. Namba, 8. syyskuuta 2010, eurooppalainen patenttihakemus EP 2226635 A1). Toistaiseksi on vain kaksi julkaistua tutkimusta, jotka ovat arvioineet tätä seuraavan sukupolven määritystä, ja tutkimukset osoittavat ristiriitaisia ​​tuloksia. Gomathi et ai. Havaitsivat yleisen herkkyyden ja spesifisyyden vähenemisen. (8) – vastaavasti 76% ja 86%. Pokam et ai. raportoivat herkkyyden ja spesifisyyden lähestyvän 100%, mikä on verrattavissa alkuperäisen esseen (9) vastaavuuteen.

Tutkimus tehtiin käynnissä olevan tutkimuksen isolaateilla, joissa arvioidaan GeneXpert MTB / RIF -testin (Xpert) käyttöä Lusakassa, Sambiassa. Yskenäytteet kerättiin epäiltyistä tuberkuloosista (TB) ja vahvistetuista tuberkuloosipotilaista, jotka osallistuivat rutiinipalveluihin ja joille Xpert havaitsi tuberkuloosia tai tuberkuloosia rifampiiniresistenssillä, ja 10 prosentista niistä, joille Xpert ei havainnut tuberkuloosia, laadunvarmistamiseksi, rifampiiniresistenssin vahvistamiseksi, ja hoidon seurantatarkoituksiin. Tutkimuksella oli eettinen hyväksyntä Sambian yliopiston eettisen komitean toimesta, ja kaikki potilaat antoivat kirjallisen tietoon perustuvan suostumuksen ennen yskösnäytteiden toimittamista mykobakteeriviljelmään.

Arviointiprotokolla
Jokainen kolmesta testistä tehdään kunkin valmistajan
ohjeiden mukaisesti seuraavien määrittämiseksi.
1. Herkkyys M. tuberculosis -havaitsemiseksi MGIT-viljelmillä
a. Kukin paikka ympää 25 erilaista MTB-potilaskantaa MGIT-putkiin ja
lataa ne BACTEC MGIT 960 -laitteeseen
b. Kukin paikka testaa positiiviset viljelmät käyttämällä kolmea määritystä ensimmäisenä päivänä, jolloin
viljelmät signaalivat positiivisena
c. Lue ja kirjaa testitulokset tarkkaan ajankohtaan, joka on suositeltavaa kussakin testipakkauslehdessä
(15 min), ja lukea uudelleen 30 minuutin ja 60 minuutin kohdalla (päivä 1 ja päivä 3
klo 15, 30 ja 60 min)
d. Tallenna kaistan voimakkuus sekä testi- että vertailulinjoille (“negatiivinen” (-),
“Erittäin heikko” (+/-), “heikko” (+), “keskitaso” (++) ja “vahva” (+++).
e. Viljelmiä, joiden testitulos on negatiivinen, inkuboidaan uudelleen 36 ° C: n inkubaattorissa
vielä 48 tuntia ennen uudelleentestausta.

2. Herkkyys M. tuberculosis -havaitsemiseksi LJ-viljelmillä
a. Kukin paikka inokuloi 20 erilaista potilaskantaa MTB-kantoja LJ-alustalle
ja inkuboi 36 ° C: ssa näkyvien pesäkkeiden ilmaantumiseen.
b. Valmista jokaisen kannan suspensio, joka vastaa MacFarlandin sameusstandardia
1.0, kuhunkin testipakkaukseen sisältyvään puskuriin.
c. Valmistetaan laimennukset jokaisesta 1,0 MacFarland-standardisuspensiosta
määrityspuskurissa arvoon 1:10 ja 1: 100.
d. Testaa jokaisen MTB-kannassuspension kaikki kolme laimennosta käyttämällä kutakin
kolmea immunomääritystä
e. Lue ja kirjaa testitulokset tarkkaan ajankohtaan, joka on suositeltavaa kussakin testipakkauslehdessä
(15 min), ja lukea uudelleen 30 minuutin ja 60 minuutin kohdalla (jokaisella laimennuksella:
1,0, 1/10 ja 1/100)
f. Tallenna kaistan voimakkuus sekä testi- että kontrollilinjoille (”negatiivinen” (-),
“hyvin heikko” (+/-), “heikko” (+), “keskitaso” (++) ja “vahva” (+) ++).

Päätelmät :
• Kaikki kolme testiä osoittivat 100% herkkyyden M-tuberkuloosin havaitsemiseksi
MGIT: stä positiivisuuspäivänä.
• Kahden kiinteässä viljelmässä käytettäväksi osoitetun testin (Capilia TB NEO
ja SD TB Ag MPT64 -pikatesti) herkkyys oli 100% M. tuberculosis -bakteerin havaitsemiseksi
LJ-viljelmillä kasvatetuista isolaateista, kun ne suoritettiin pakkausselosteiden mukaisesti.
BD MGIT TBc Tunnistaminen Testi ei ole tarkoitettu käytettäväksi kiinteän mediakulttuureissa
ja näytti vähentyneen herkkyyden, kun niitä testattiin LJ-kantojen menettelyä

käytetään tässä tutkimuksessa.
• Capilia TB Neo ja BD MGIT ID -testi eivät antaneet vääriä positiivisia tuloksia
minkään testatun NTM: n kanssa (spesifisyys 100%). SD Bioline TB Ag MPT64 antoi heikot vääriä positiivisia tuloksia kahdella M. mahakannalla yhdessä neljästä tutkimuskohteesta. •
Testien toiminnalliset ominaisuudet olivat samanlaiset. Teknologit pitivät
Capilia TB Neo -määritystä helpommin luettavana johtuen testikaistan vahvemmasta kaistan voimakkuudesta
verrattuna kahteen muuhun määritykseen. SD TB Ag MPT64 -pikatesti osoitti taustatekijöitä, jotka estävät testin tulkintaa, jos se luetaan 30 minuutin kuluttua, vaikka valmistajan ohjeet sallivat sen. BD MGIT ID -testiä ei ole valmistettu käytettäväksi kiinteiden viljelmien isolaattien kanssa.

Yhteenvetona voidaan todeta, että nyt on olemassa kolme kaupallisesti tuotettua pikatestiä, jotka mahdollistavat
M. tuberculosisin erittäin herkän tunnistamisen positiivisista MGIT-viljelmistä. Kaksi näistä valmistetaan myös käytettäväksi kiinteiden viljelmien isolaattien kanssa ja niiden
suorituskyky on hyvä . Kaikki kolme määritystä osoittavat hyväksyttävän yleisen herkkyyden, spesifisyyden ja
helppokäyttöisyyden. SD-määritys osoitti enemmän taustaväriä pitkittyneillä
lukuaikoilla ja se voi reagoida ristireaktiossa M. gastrin kanssa, ja BD MGIT ID -testi osoitti jonkin verran heikompia testivyöhykkeitä, jolloin tuloksista tuli vähemmän ilmeisiä.

 

Bovine Tuberculosis (TB) antibody rapid test card
LSY-20066	Shenzhen Lvshiyuan Biotechnology	40 test/kit	Ask for price

HIV 1/2 Ab Test including sub type O. POCT (Lancet, Capillary tube, Alcohol swab Incld.)
03FK13	Abbott	1 tests/kit	EUR 60.5

Human Tuberculosis IgG (TB IgG) Rapid Test Kit
abx092084-100l	Abbexa	100 µl	EUR 225

Human Tuberculosis IgG (TB IgG) Rapid Test Kit
abx092084-1ml	Abbexa	1 ml	Ask for price

Human Tuberculosis IgG (TB IgG) Rapid Test Kit
abx092084-200l	Abbexa	200 µl	EUR 350

Malaria Differential P.f/Pan Ag Test (HRP II+ pLDH) POCT (Lancet, Capillary tube, Alcohol swab Incld.)
05FK63	Abbott	1 tests/kit	EUR 148.5

Human Tuberculosis IgG/IgM (TB IgG/IgM) Rapid Test Kit
abx092267-100l	Abbexa	100 µl	EUR 1925

Human Tuberculosis IgG/IgM (TB IgG/IgM) Rapid Test Kit
abx092267-1ml	Abbexa	1 ml	EUR 26250

Human Tuberculosis IgG/IgM (TB IgG/IgM) Rapid Test Kit
abx092267-200l	Abbexa	200 µl	EUR 6600

Recombinant human Protein capicua homolog
P2894	FN Test	100ug	Ask for price
Description: Recombinant protein for human Protein capicua homolog

MTB Real-TM-Real Time PCR test for detection of TB
B15-50FRT	Sacace Biotechnologies	50	EUR 359.7

Human TES(Testin) ELISA Kit
EH1738	FN Test	96T	EUR 681.12
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Homo sapiens;Sensitivity: 0.375 ng/ml

T(Testosterone) ELISA Kit
EU0400	FN Test	96T	EUR 571.5
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: General;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Rat T(Testosterone) ELISA Kit
ER1462	FN Test	96T	EUR 628.92
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Rattus;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Human Testosterone ELISA Kit
EH4850	FN Test	96T	EUR 628.92
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Homo sapiens ;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Mouse Testosterone ELISA Kit
EM1850	FN Test	96T	EUR 628.92
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Mus ;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Human SPOCK2(Testican-2) ELISA Kit
EH2271	FN Test	96T	EUR 681.12
Description: Method of detection: Double Antibody, Sandwich ELISA;Reacts with: Homo sapiens;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Bovine T(Testosterone) ELISA Kit
EB0049	FN Test	96T	EUR 681.12
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Cattle;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Recombinant human Testican-2
P1475	FN Test	100ug	Ask for price
Description: Recombinant protein for human Testican-2

Human TEX101(testis expressed 101) ELISA Kit
EH12903	FN Test	96T	EUR 681.12
Description: Method of detection: Double Antibody, Sandwich ELISA;Reacts with: Homo sapiens ;Sensitivity: 0.188 ng/ml

Human F-TESTO(Free Testoterone) ELISA Kit
EH3092	FN Test	96T	EUR 571.5
Description: Method of detection: Coated with Antigen, Competitive ELISA;Reacts with: Homo sapiens;Sensitivity: 9.375pg/ml

Recombinant human Testis-specific Y-encoded-like protein 5
P1359	FN Test	100ug	Ask for price
Description: Recombinant protein for human Testis-specific Y-encoded-like protein 5

Neomycin Rapid Test Kit
100010	Ring Biotechnology Co	96T	EUR 85
Description: Milk Test

Neomycin ELISA test kit
LSY-10005	Shenzhen Lvshiyuan Biotechnology	96 well/kit	Ask for price

Neomycin rapid test strip
LSY-20041	Shenzhen Lvshiyuan Biotechnology	96 test/kit	Ask for price

Recombinant human Protein disulfide-isomerase-like protein of the testis
P2148	FN Test	100ug	Ask for price
Description: Recombinant protein for human Protein disulfide-isomerase-like protein of the testis

Human PDHA2(Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, testis-specific form, mitochondrial) ELISA Kit
EH1149	FN Test	96T	EUR 681.12
Description: Method of detection: Double Antibody, Sandwich ELISA;Reacts with: Homo sapiens;Sensitivity: 0.094 ng/ml

Rat Pdha2(Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, testis-specific form, mitochondrial) ELISA Kit
ER0417	FN Test	96T	EUR 681.12
Description: Method of detection: Double Antibody, Sandwich ELISA;Reacts with: Rattus;Sensitivity: 46.9pg/ml