Johdanto
Alla kuvattua coomassie-värjäysprotokollaa suositellaan Invitrogen Novex -geelien värjäykseen. Voit käyttää mitä tahansa valitsemaasi Coomassie-värjäysprotokollaa.
Tarvittavat materiaalit
Käyttäjän toimittamat materiaalit:
Tarvitset seuraavat tarvikkeet Coomassie Blue Stainingille.
- Invitrogen SimplyBlue SafeStain
- Kolloidinen sininen värjäyssarja
- Värjäysastia
- Deionisoitu vesi
- Orbital Shaker
- 0,1% Coomassie R-250 40% etanolissa ja 10% etikkahapossa (jos käytetään Invitrogen Coomassie R-250 -värjäystä)
- Säilytysliuos, joka sisältää 10% etanolia ja 7,5% etikkahappoa (jos käytetään Invitrogen Coomassie R-250 -värjäystä)
- Metanoli
Tilaustiedot
Catalog #NameSizePrice (INR) Määrä
| LC6065 | SimplyBlue SafeStain | 3,5 litraa | 36,027.00 | ||
SimplyBlue SafeStain -protokolla
Yleiskäyttöön 1,0 mm: n ja 1,5 mm: n Tris-glysiinigeelien, 1,0 mm: n trisiini-, Zymogram- ja IEF-minigeelien (8 x 8 cm) kanssa.
Seuraa elektroforeesin jälkeen alla olevia ohjeita. Varmista, että minigeeli liikkuu vapaasti vedessä tai tahrassa diffuusion helpottamiseksi kaikissa vaiheissa.
Huuhtele minigeeliä 3 kertaa 5 minuutin ajan 100 ml: lla deionisoitua vettä SDS: n ja puskurisuolojen poistamiseksi, jotka häiritsevät väriaineen sitoutumista proteiiniin. Hävitä kukin huuhtelu.
Värjää minigeeli riittävällä määrällä Invitrogen ™ SimplyBlue ™ SafeStain (20-100 ml) geelin peittämiseksi. Tahraa 1 tunti huoneenlämmössä ravistellen kevyesti. Yhtyeet alkavat kehittyä muutamassa minuutissa. Inkubaation jälkeen hävitä tahra. Tahraa ei voida käyttää uudelleen. Huomaa: Geeliä voidaan värjätä jopa 3 tuntia, mutta 3 tunnin kuluttua herkkyys vähenee. Jos sinun on jätettävä geeli yön yli tahraan, lisää 2 ml 20-prosenttista NaCl (w / v) veteen jokaista 20 ml tahraa kohti. Tämä menettely ei vaikuta herkkyyteen.
Pese minigeeli 100 ml: lla vettä 1-3 tuntia. Geeli voidaan jättää veteen useita päiviä ilman herkkyyden menetystä. Vedessä on pieni määrä väriainetta, joka on tasapainossa proteiiniin sitoutuneen väriaineen kanssa, joten proteiinit pysyvät sinisinä.
Saadaksesi kirkkaimman taustan valokuvaukselle, suorita toinen tunnin pesu 100 ml: lla vettä. Huomaa: Herkkyys vähenee nyt, jos geelin annetaan pysyä vedessä yli yhden päivän ajan. Vapaan väriaineen pelkistyminen vedessä suosii värin irtoamista proteiinista. Jos sinun on säilytettävä geeliä muutaman päivän ajan, lisää 20 ml 20% NaCl: a.
Kolloidinen sininen värjäyssarjaprotokolla
Valmista värjäysliuos yksittäiselle geelille alla olevassa taulukossa kuvatulla tavalla. Kahden geelin kohdalla kaksinkertainen määrä värjäykseen käytettyjä reagensseja. Ravista Stainer B: tä ennen liuoksen tekemistä.
| Ratkaisut | Tris-glysiini, trisiini |
| Deionisoitu vesi | 55 ml |
| Metanoli | 20 ml |
| Tahra B | 5 ml |
| Tahra A | 20 ml |
Inkuboi geeli tässä värjäysliuoksessa seuraavasti huoneenlämpötilassa ravistellen varovasti:
-
-
- Tris-glysiini-, trisiini- ja Zymogram-geelit vähintään 3 tuntia ja enintään 12 tuntia.
- IEF-geelit 30 minuutin ajan.
-
Dekantoidaan värjäysliuos ja lisätään värjäysastiaan vähintään 200 ml deionisoitua vettä geeliä kohti. Ravista geeliä varovasti vedessä vähintään 7 tuntia. Geelillä on selkeä tausta 7 tunnin kuluttua vedessä.
Huomaa: Novex-geelit voidaan jättää deionisoituun veteen enintään 3 päiväksi ilman merkittäviä muutoksia kaistan voimakkuudessa ja taustan kirkkaudessa.
Pitkäaikaista varastointia varten (yli 3 päivää) pidä geeli 20% ammoniumsulfaattiliuoksessa 4 ° C: ssa.
Coomassie R-250 -värjäysprotokolla
- Valmista värjäysliuos, joka sisältää 0,1% Coomassie R-250: tä 40% etanolissa, 10% etikkahapossa.
- Elektroforeesin jälkeen inkuboi 1 tai 2 geeliä värjäysastiassa, joka sisältää 100 ml Coomassie Blue R-250 -värjäysliuosta. Varoitus: Ole varovainen, kun teet seuraavia vaiheita mikroaaltouunilla. Älä ylikuumenta värjäysliuoksia.
- Peitä värjäysastia löysästi ja kuumenna mikroaaltouunissa täydellä teholla 1 minuutin ajan. Älä anna liuoksen kiehua, jotta vaaralliset, syttyvät höyryt eivät muodostuisi.
- Poista värjäysastia mikroaaltouunista ja ravista geeliä varovasti 15 minuuttia huoneenlämmössä kiertoravistimessa.
- Dekantoi tahra ja huuhtele geeli kerran deionisoidulla vedellä.
- Valmista destainiliuos, joka sisältää 10% etanolia ja 7,5% etikkahappoa.
- Aseta yksi tai kaksi värjättyä geeliä värjäysastiaan, joka sisältää 100 ml destainiliuosta.
- Peitä värjäysastia löysästi ja kuumenna mikroaaltouunissa täydellä teholla 1 minuutin ajan.
- Ravista geeliä varovasti huoneenlämmössä kiertoravistimessa, kunnes haluttu tausta saavutetaan.
Coomassie Blue Staining Destaining Solution |
|||
| AR0140 | BosterBio | 1kit (for 10 assays to stain gels of 5 x 8.5cm) | EUR 84 |
Coomassie Brilliant Blue Fast Staining Solution |
|||
| abx090652-200ml | Abbexa | 200 ml | EUR 243.6 |
SDS-Blue™ - Coomassie based solution for protein staining in SDS-PAGE |
|||
| 04-GSB | Gentaur Genprice |
|
|
|
Description: SDS-Blue™ is an innovative patented formula, based on Coomassie blue, that comes in a convenient ready to use format for staining proteins in SDS-PAGE (sodium dodecyl sulphate–polyacrylamide gel electrophoresis). The formulation of SDS-Blue™ provides numerous advantages compared to the classic Coomassie staining or to other similar protein stains. SDS-Blue™ provides higher sensitivity, virtually no background and eliminates the need for destaining of the gel due to its high specificity and affinity to bind to protein only. Not only does SDS-Blue™ yield clear and sharp bands, but it also contains no methanol and acetic acid, making it non-hazardous, safe to handle and friendly to the environment when disposed of. Two other advantages that make SDS-Blue™ the better option is that it is not light sensitive and can be stored at ambient temperature for 24 months. And this provides a considerable convenience, especially to laboratories that need and keep big amount of protein staining solutions – no more jammed refrigerators, you can keep SDS-Blue™ wherever it is most convenient for You! |
|||
Protein Stain-EZG Rapid Coomassie Blue Stain Solution |
|||
| BSP041 | Bio Basic | 1KIT, 10prep | EUR 91.32 |
Coomassie Brilliant Blue Gel Staining Kit |
|||
| abx090653-1Kit | Abbexa | 1 Kit | EUR 226.8 |
Coomassie Brilliant Blue Solution |
|||
| GR103030 | Genorise Scientific | 100 mL | EUR 83 |
Protein Stain-EZ A Ultra Sensitive Coomassie Blue Stain Solution |
|||
| SK3011 | Bio Basic | 10Minigel, 10UNIT | EUR 79.84 |
SuperPower (TM) Stain Tablet, Fast Staining Coomassie G-250 |
|||
| DG-STAIN | Bio Basic | 5drytablets, 5prep | EUR 192.24 |
Ponceau S Staining Solution |
|||
| B7778-100000 | ApexBio | 100 g | EUR 195.6 |
Ponceau S Staining Solution |
|||
| B7778-50000 | ApexBio | 50 g | EUR 151.2 |
SDS-PAGE Staining Solution |
|||
| GR103068 | Genorise Scientific | 100 mL | EUR 58 |
Ponceau S Staining Solution |
|||
| PW005 | Bio Basic | 100ml | EUR 82.97 |
ProsiBlue Gel Staining Solution |
|||
| P7300-050 | GenDepot | 500ml | EUR 208.8 |
7-AAD Viability Staining Solution |
|||
| EXB0026 | ExBio | 400 tests | EUR 91.2 |
SafePinky DNA Gel Staining Solution |
|||
| S1000-050 | GenDepot | 500ml | EUR 157.2 |
SafePinky DNA Gel Staining Solution |
|||
| S1000-100 | GenDepot | 2X500ml | EUR 225.6 |
SafePinky DNA Gel Staining Solution |
|||
| S1000-200 | GenDepot | 4X500ml | EUR 336 |
dsGreen Gel Staining Solution, 10000×, 0.5 mL |
|||
| 10010 | Lumiprobe | 0.5 mL | EUR 106.8 |
dsGreen Gel Staining Solution, 10000×, 50 uL |
|||
| A0010 | Lumiprobe | 50 uL | EUR 62.4 |
Safe E-Red DNA Gel Staining Solution(1000x) |
|||
| S1002-001 | GenDepot | 1ml | EUR 133.2 |
Safe E-Red DNA Gel Staining Solution(1000x) |
|||
| S1002-005 | GenDepot | 5x1ml | EUR 271.2 |
Safe E-Red DNA Gel Staining Solution(1000x) |
|||
| S1002-010 | GenDepot | 10ml | EUR 360 |
Safe E-Red DNA Gel Staining Solution(1000x) |
|||
| S1002-020 | GenDepot | 20ml | EUR 595.2 |
SafePinky DNA Gel Staining Solution(10,000X) In Water |
|||
| S1001-025 | GenDepot | 250ul | EUR 193.2 |