Proteinaasi K: n puhdistettu rekombinantti

Kuvaus

Thermo Scientific Proteinase K on laaja-alainen endolyyttinen proteaasi, jota käytetään laajasti proteiinien pilkkomiseen nukleiinihappovalmisteissa. Se hajottaa proteiineja jopa pesuaineiden läsnä ollessa. Proteinaasi K katkaisee peptidisidokset alifaattisten, aromaattisten tai hydrofobisten aminohappojen karboksyylipuolilla. Proteinaasi K on luokiteltu seriiniproteaasiksi. Pienin tällä entsyymillä hydrolysoituva peptidi on tetrapeptidi.

Kohokohdat

• Käyttövalmis liuos
• Aktiivinen monenlaisissa reaktio-olosuhteissa

Sovellukset

• Genomisen DNA: n
eristäminen hiiren hännästä • Genomisen DNA: n eristäminen viljellyistä soluista
• DNaasien ja RNaasien poisto eristettäessä DNA: ta ja RNA: ta kudoksista tai solulinjoista
• Entsyymipaikan määrittäminen
• PCR-tuotteiden kloonaustehokkuuden parantaminen

 

Fungus-Derived Proteinase K Purified Recombinant
Fungus-Derived Proteinase K Purified Recombinant



Huomautus

• Proteinaasi K: n suositeltu työskentelypitoisuus on 0,05–1 mg / ml. Aktiivisuus entsyymin stimuloidaan 0,2-1% SDS tai 1-4 M urea
• Ca2 + suojaa proteinaasi K vastaan autolyysin, lisää lämpöstabiilisuus, ja on säätelemään substraattia sitovaan proteinaasi K
• Vakaa yli laaja pH-alue:
4,0–12,5 , optimaalinen pH 7,5–8,0 • Optimaalinen aktiivisuus 50–55 ° C: ssa
• Entsyymin nopea denaturoituminen tapahtuu yli 65 ° C: n lämpötiloissa

Sienestä johdettu proteinaasi K: n puhdistettu rekombinantti innovatiivisesta tutkimuksesta valmistetaan pitoisuudella 20 mg / ml 10 mM Tris-HCl: ssä, 1 mM kalsiumasetaatissa, pH 7,5, joka sisältää 50% glyserolia. Tämä on neste, jonka pitoisuus on 400 yksikköä / ml.

Tämä tuote on käyttökelpoinen aikaansaamalla peptidisidosten katkaisu ja kykenee katalysoimaan peptidiamidin hydrolyysiä. Sen on testattu olevan vapaa DNaasista ja RNaasista. Tiivistetty ja käyttövalmis neste.

Lisätietoja:

  • Lähde:  Hiiva (Rekombinantti Tritiachium-albumi Proteinase K)
  • Säilytysolosuhteet:  -20 ° C

Innovatiivisessa tutkimuksessa tarjoamme luotettavia, yhtenäisiä tuotteita, jotka tuottavat luotettavia, yhtenäisiä tuloksia.

 

Käyttökohteet
Endogeenisten nukleaasien poisto DNA: n ja RNA: n valmistuksen aikana; kudosleikkeiden valmistelu  in situ  -hybridisaatiota varten.

Suorituskyvyn ja laadun testaus
Endodeoksiribonukleaasi- ja eksodeoksiribonukleaasimääritykset; nestemäinen muoto testattu RNaasiaktiivisuuden puuttumisen varalta.

Yksikkömääritys
Yksi mAnson-yksikkö kuvataan entsyymimääräksi, joka vapauttaa 1 umoolia Folin-positiivista aminohappoa minuutin kuluessa 37 ° C: ssa käyttäen hemoglobiinia substraattina.

Ominaisuudet ja Edut

Proteinaasi K katkaisee proteiinit aminohappojen X ja Y (X-  -Y) välillä, kun X = alifaattinen, aromaattinen tai hydrofobinen aminohappo ja Y = mikä tahansa aminohappo. Entsyymi on erittäin tehokas natiiviproteiineissa, ja sitä voidaan siksi käyttää inaktivoimaan endogeeniset nukleaasit, kuten RNaasit ja DNaasit.

Proteinase K, recombinant
Proteinase K, recombinant
  • Valitse tehokas työkalu mallin valmisteluun. Inaktivoi useimpien lajien DNaasit ja RNaasit.
  • Luota jatkuvaan laatuun ja suorituskykyyn.  Tiukka laatutestaus takaa optimaalisen vakauden ja korkean tason erästä erään-suorituskyvyn.
  • Valmistele näytteet monenlaisissa olosuhteissa.  Vankka entsyymi on stabiili laajalla pH-alueella ja sopii erinomaisesti erilaisiin sovelluksiin.
  • Hyödynnä saasteettomasta entsyymistä.  Entsyymi testataan RNaasien ja DNaasien puuttumisen suhteen, ja se on käytännöllisesti katsoen vapaa DNA: sta. Se soveltuu erityisesti PCR-mallien eristämiseen.

Laatu

Tämä valmiste ei sisällä RNaaseja, DNaaseja ja DNA: ta nykyisten laadunvalvontamenetelmien mukaisesti.
Nukleaasien puuttuminen:  Jokainen erä testataan erilaisilla substraateilla endonukleaasin, eksonukleaasin, ribonukleaasin ja nikkelöivän aktiivisuuden puuttumisen varmistamiseksi.
DNA-pitoisuus:  ≤10 pg / mg entsyymiä (määritetään kynnysarvon mukaan)
Biopurden:  ≤5 cfu / g (määritetään Euroopan farmakopean tiukimmalla testillä, joka tunnistaa elinkelpoisten aerobisten bakteerien, hiivan ja sienien kokonaismäärän)

Yksikön määritelmä

Tilavuusaktiivisuus: noin 50 U / ml liuosta (kromotsyymimääritys); noin 600 U / ml liuosta (hemoglobiinimääritys). Yksi yksikkö on entsyymiaktiivisuus, joka pilkkoutuu +25 ° C: ssa 1 minuutissa 18 mmol Chromozym TRY: tä (vastaa 600 U / ml hemoglobiinimäärityksellä). Katso tämän erän tarkat arvot Analyysitodistuksesta.

Valmisteluhuomautus

Aktivaattori:  Proteinaasi K -aktiivisuuden stimuloimiseksi voidaan lisätä denaturointiaineita (SDS ja urea). Esimerkiksi SDS 2%: n loppupitoisuudella voi lisätä proteinaasi K: n aktiivisuutta merkittävästi. Optimointi denaturoivilla aineilla voi lisätä proteinaasiaktiivisuutta jopa seitsenkertaisesti. 

Työskentelyliuos: Ehdotetut puskurit:
Sopivin proteinaasi K -puskuri vaihtelee sovelluksesta toiseen. Noudata aina annettujen parametrien pH- ja lämpötilaohjeita. Yleensä proteinaasi K on stabiili ja erittäin aktiivinen puskurissa, joka sisältää denaturointireagensseja, kuten ureaa, natriumdodekyylisulfaattia (SDS) ja guanidiinisuoloja.

Estäjät:  Entsyymi inaktivoidaan Pefabloc ®  SC. Sitä ei kuitenkaan inaktivoi metalli-ionit, kelaatinmuodostajat (esim. EDTA), sulfhydryylireagenssit tai trypsiini- ja kymotrypsiini-inhibiittorit.

Muut huomautukset

RNaasien ja DNaasien nopeaan inaktivointiin.
Entsyymi voi pelkistää proteiinin vapaiksi aminohapoiksi, jos sitä on suurina ylimäärinä pitkiä inkubointijaksoja.
Vain biotieteelliseen tutkimukseen. Ei käytettäväksi diagnostisissa toimenpiteissä.

K-Ras Activation Assay

STA-400-K 20 assays
EUR 757
Description: Our Ras Activation Assays use visible agarose beads to selectively precipitate the active form of specific Ras protein of interest. The precipitated small GTPase is then detected by Western blot using a target-specific antibody included in the kit. Assays are available to detect specific isoforms H-Ras, K-Ras, and N-Ras, as well as a Pan-Ras assay that detects all three isoforms.

K-Ras Activation Assay Kit, Trial Size

STA-400-K-T 5 assays
EUR 403
Description: Our Ras Activation Assays use visible agarose beads to selectively precipitate the active form of specific Ras protein of interest. The precipitated small GTPase is then detected by Western blot using a target-specific antibody included in the kit. Assays are available to detect specific isoforms H-Ras, K-Ras, and N-Ras, as well as a Pan-Ras assay that detects all three isoforms.

Eupalinolide K

HY-N2240 5mg
EUR 1231

Hosenkoside K

HY-N2243 5mg
EUR 268

K-756

HY-U00422 10mM/1mL
EUR 277

K-80003

HY-U00458 25mg
EUR 497

Proteinase K

AR0056 5mL
EUR 101

K-7174

HY-12743 50mg
EUR 533

Vitamin K

HY-B2172 500mg
EUR 215

Ginkgolide K

HY-N4176 10mM/1mL
EUR 307

Terrestrosin K

HY-N5078 1mg
EUR 179

K-252a

HY-N6732 5mg
EUR 1187

Proteinase K

abx082041-100mg 100 mg
EUR 258

Proteinase K

abx098140-1ml 1 ml
EUR 189

K-252a

GL3770-100UG 100 ug
EUR 181

K-252a

GL3770-1MG 1 mg
EUR 585

K-252c

GL4832-1MG 1 mg
EUR 160

K-252c

GL4832-5MG 5 mg
EUR 436

Proteinase K

GE0990-1G 1 g
EUR 413

Proteinase K

GE0990-250MG 250 mg
EUR 154

Proteinase K

GE0990-500MG 500 mg
EUR 249

Proteinase K

GE0990-100MG 100 mg
EUR 94

Proteinase K

GE0990-25MG 25 mg
EUR 58

Leave a Comment