Kuvaus
Thermo Scientific Proteinase K on laaja-alainen endolyyttinen proteaasi, jota käytetään laajasti proteiinien pilkkomiseen nukleiinihappovalmisteissa. Se hajottaa proteiineja jopa pesuaineiden läsnä ollessa. Proteinaasi K katkaisee peptidisidokset alifaattisten, aromaattisten tai hydrofobisten aminohappojen karboksyylipuolilla. Proteinaasi K on luokiteltu seriiniproteaasiksi. Pienin tällä entsyymillä hydrolysoituva peptidi on tetrapeptidi.
Kohokohdat
• Käyttövalmis liuos
• Aktiivinen monenlaisissa reaktio-olosuhteissa
Sovellukset
• Genomisen DNA: n
eristäminen hiiren hännästä • Genomisen DNA: n eristäminen viljellyistä soluista
• DNaasien ja RNaasien poisto eristettäessä DNA: ta ja RNA: ta kudoksista tai solulinjoista
• Entsyymipaikan määrittäminen
• PCR-tuotteiden kloonaustehokkuuden parantaminen
Huomautus
• Proteinaasi K: n suositeltu työskentelypitoisuus on 0,05–1 mg / ml. Aktiivisuus entsyymin stimuloidaan 0,2-1% SDS tai 1-4 M urea
• Ca2 + suojaa proteinaasi K vastaan autolyysin, lisää lämpöstabiilisuus, ja on säätelemään substraattia sitova kohta proteinaasi K
• Vakaa yli laaja pH-alue:
4,0-12,5 , optimaalinen pH 7,5-8,0 • Optimaalinen aktiivisuus 50-55 ° C: ssa
• Entsyymin nopea denaturoituminen tapahtuu yli 65 ° C lämpötiloissa
Kuvaus
Proteinaasi K on erittäin reaktiivinen seriiniproteaasi, jolla on kyky sulattaa natiivia proteiineja, inaktivoida siten entsyymit, kuten DNaasi ja RNaasi, turvautumatta denaturointiprosessiin. Se on tehokkain proteinaasi kaikkien tähän mennessä karakterisoitujen proteinaasien joukossa. Se pilkkoutuu peptidisidokseen alifaattisten, aromaattisten tai hydrofobisten aminohappojen karboksyylihapporyhmän viereen.
Rekombinanttia proteinaasia K käytetään suurien molekyylipainojen nukleiinihappojen eristämiseen tai valmistamiseen. Se on erittäin puhdasta ja sillä on korkeampi spesifinen aktiivisuus ja se on vakaampi huoneenlämmössä verrattuna alkuperäiseen proteinaasi K: hon.
Rekombinantti proteinaasi K: ta ilmentyy hiivasta Pichia pastoriksesta Engyodontium-albumia (Tritirachium album) endosyyttistä proteaasia koodaavalla kloonatulla geenillä .
Sovellukset
- Rekombinantti proteinaasi K on erittäin tehokas natiivissa proteiineissa, ja sitä voidaan siksi käyttää inaktivoimaan endogeeniset nukleaasit, kuten RNaasit ja DNaasit. Tämä ominaisuus tekee proteinaasi K: sta erityisen sopivan natiivin RNA: n ja DNA: n eristämiseen kudoksista tai solulinjoista.
- Käytetään kalvorakenteiden analysointiin modifioimalla proteiineja ja glykoproteiineja solupinnoilla.
- Sopii erityisen hyvin nukleiinihappojen eristämiseen amplifikaatioreaktioita varten.
- Edistää solujen hajoamista aktivoimalla bakteerien autolyyttisen tekijän.
- Käytetään solujätteiden poistamiseen pesäkkeitä valmisteltaessa ja kudososien käsittelyyn koettimen tehokkaan tunkeutumisen varmistamiseksi in situ -hybridisaation aikana.
Käyttövalmiiksi saattamista koskevat suositukset
Varastoon liuos valmistamiseksi, suosittelemme liuottamalla lyofilisoitu jauhe puskurissa (20 mM Tris, 1 mM CaCI 2 , 2% glyseroli, pH 7,4).
Kalsium on tärkeä proteinaasi K: n termostabiilisuudelle ja pH-arvo on kriittinen korkealle liukoisuudelle.
Kylmäsuojaaineen glyserolin käyttö lopulliseen 50%: n pitoisuuteen kantaliuoksessa on estää jäätymis- / sulamisvauriot. Proteinaasi K: lla säilyi 99% aktiivisuudesta 12 pakastus- / sulatussyklin jälkeen varastoliuoksessa. Vältä toistuvaa jäätymistä ja sulatusta proteiinin saostumisen estämiseksi, jos glyserolia ei lisätä.
Proteinaasi K -liuos pysyy aktiivisena laajalla pH-alueella (4,0-12,5, käytetään usein välillä 7,5-9,0) ja laajalla lämpötila-alueella 25-75 ° C. Liuos pysyy steriilinä ja stabiilina vähintään 12 kuukauden ajan 4 ° C: ssa.
Lys proteins Antibody |
|||
DF2705 | Affbiotech | 200ul | EUR 420 |
Lys proteins Blocking Peptide |
|||
DF2705-BP | Affbiotech | 1mg | EUR 234 |
Anti-Bovine Plasma Proteins |
|||
BPP04 | Cygnus Technologies | 1 ml | EUR 400.8 |
Description: Anti-Bovine Plasma Proteins by Cygnus Technologies is available in Europe via Gentaur. |
Anti-Bovine Plasma Proteins |
|||
BPP04-AF | Cygnus Technologies | 1 mg | EUR 2295.6 |
Description: Anti-Bovine Plasma Proteins by Cygnus Technologies is available in Europe via Gentaur. |
Anti-Bovine Plasma Proteins |
|||
BPP04-PA | Cygnus Technologies | 1 ml | EUR 585.6 |
Description: Anti-Bovine Plasma Proteins by Cygnus Technologies is available in Europe via Gentaur. |
Anti-Bovine Plasma Proteins |
|||
BPP04AF-HRP | Cygnus Technologies | 100 ul | EUR 1186.8 |
Description: Anti-Bovine Plasma Proteins by Cygnus Technologies is available in Europe via Gentaur. |
serum proteins kit dysproteinaemia |
|||
EHCA1200-KC30-R | Consort | ea | EUR 136.8 |
K 579 |
|||
A4426-10 | ApexBio | 10 mg | EUR 517.2 |
Description: Dipeptidyl peptidase IV inhibitor. Inhibits rat, canine, human and monkey enzymes with IC50 values of 3, 5, 8, and 8 nM respectively. Long-acting hypoglycemic agent; attenuates glucose excursion following glucose loading in Zucker fatty rats. |
K 579 |
|||
A4426-50 | ApexBio | 50 mg | EUR 1987.2 |
Description: Dipeptidyl peptidase IV inhibitor. Inhibits rat, canine, human and monkey enzymes with IC50 values of 3, 5, 8, and 8 nM respectively. Long-acting hypoglycemic agent; attenuates glucose excursion following glucose loading in Zucker fatty rats. |
Proteinase K |
|||
abx082041-100mg | Abbexa | 100 mg | EUR 309.6 |
Proteinase K |
|||
abx098140-1ml | Abbexa | 1 ml | EUR 226.8 |
K-252c |
|||
A8344-1 | ApexBio | 1 mg | EUR 204 |
Description: K-252c is a cell-permeable, reversible, and ATP-competitive inhibitor of protein kinase C (PKC) and protein kinase A (PKA) with IC50 value of 2.45 ?M and 25.7 ?M, respectively. |
K-252c |
|||
A8344-25 | ApexBio | 25 mg | EUR 1452 |
Description: K-252c is a cell-permeable, reversible, and ATP-competitive inhibitor of protein kinase C (PKC) and protein kinase A (PKA) with IC50 value of 2.45 ?M and 25.7 ?M, respectively. |
K-252c |
|||
A8344-5 | ApexBio | 5 mg | EUR 616.8 |
Description: K-252c is a cell-permeable, reversible, and ATP-competitive inhibitor of protein kinase C (PKC) and protein kinase A (PKA) with IC50 value of 2.45 ?M and 25.7 ?M, respectively. |
K-252c |
|||
A8344-5.1 | ApexBio | 10 mM (in 1mL DMSO) | EUR 518.4 |
Description: K-252c is a cell-permeable, reversible, and ATP-competitive inhibitor of protein kinase C (PKC) and protein kinase A (PKA) with IC50 value of 2.45 ?M and 25.7 ?M, respectively. |
K 41498 |
|||
B5252-1 | ApexBio | 1 mg | EUR 856.8 |
K 114 |
|||
B5387-10 | ApexBio | 10 mg | EUR 284.4 |
K 114 |
|||
B5387-50 | ApexBio | 50 mg | EUR 1004.4 |
K-7174 |
|||
B5898-25 | ApexBio | 25 mg | EUR 1730.4 |
Description: Description:IC50: 9 ?MThe main function of the proteasome is to degrade unneeded or damaged proteins by proteolysis, a chemical reaction that breaks peptide bonds. |
K-7174 |
|||
B5898-5 | ApexBio | 5 mg | EUR 547.2 |
Description: Description:IC50: 9 ?MThe main function of the proteasome is to degrade unneeded or damaged proteins by proteolysis, a chemical reaction that breaks peptide bonds. |
K 252a |
|||
B6828-.5 | ApexBio | 500 µg | EUR 207.6 |
K 252a |
|||
B6828-1 | ApexBio | 1 mg | EUR 296.4 |
K 858 |
|||
B7480-10 | ApexBio | 10 mg | EUR 226.8 |