Kuvaus
Thermo Scientific Proteinase K on laaja-alainen endolyyttinen proteaasi, jota käytetään laajasti proteiinien pilkkomiseen nukleiinihappovalmisteissa. Se hajottaa proteiineja jopa pesuaineiden läsnä ollessa. Proteinaasi K katkaisee peptidisidokset alifaattisten, aromaattisten tai hydrofobisten aminohappojen karboksyylipuolilla. Proteinaasi K on luokiteltu seriiniproteaasiksi. Pienin tällä entsyymillä hydrolysoituva peptidi on tetrapeptidi.
Kohokohdat
• Käyttövalmis liuos
• Aktiivinen monenlaisissa reaktio-olosuhteissa
Sovellukset
• Genomisen DNA: n
eristäminen hiiren hännästä • Genomisen DNA: n eristäminen viljellyistä soluista
• DNaasien ja RNaasien poisto eristettäessä DNA: ta ja RNA: ta kudoksista tai solulinjoista
• Entsyymipaikan määrittäminen
• PCR-tuotteiden kloonaustehokkuuden parantaminen
Huomautus
• Proteinaasi K: n suositeltu työskentelypitoisuus on 0,05–1 mg / ml. Aktiivisuus entsyymin stimuloidaan 0,2-1% SDS tai 1-4 M urea
• Ca2 + suojaa proteinaasi K vastaan autolyysin, lisää lämpöstabiilisuus, ja on säätelemään substraattia sitova kohta proteinaasi K
• Vakaa yli laaja pH-alue:
4,0-12,5 , optimaalinen pH 7,5-8,0 • Optimaalinen aktiivisuus 50-55 ° C: ssa
• Entsyymin nopea denaturoituminen tapahtuu yli 65 ° C lämpötiloissa

Kuvaus
Proteinaasi K on erittäin reaktiivinen seriiniproteaasi, jolla on kyky sulattaa natiivia proteiineja, inaktivoida siten entsyymit, kuten DNaasi ja RNaasi, turvautumatta denaturointiprosessiin. Se on tehokkain proteinaasi kaikkien tähän mennessä karakterisoitujen proteinaasien joukossa. Se pilkkoutuu peptidisidokseen alifaattisten, aromaattisten tai hydrofobisten aminohappojen karboksyylihapporyhmän viereen.
Rekombinanttia proteinaasia K käytetään suurien molekyylipainojen nukleiinihappojen eristämiseen tai valmistamiseen. Se on erittäin puhdasta ja sillä on korkeampi spesifinen aktiivisuus ja se on vakaampi huoneenlämmössä verrattuna alkuperäiseen proteinaasi K: hon.
Rekombinantti proteinaasi K: ta ilmentyy hiivasta Pichia pastoriksesta Engyodontium-albumia (Tritirachium album) endosyyttistä proteaasia koodaavalla kloonatulla geenillä .
Sovellukset
- Rekombinantti proteinaasi K on erittäin tehokas natiivissa proteiineissa, ja sitä voidaan siksi käyttää inaktivoimaan endogeeniset nukleaasit, kuten RNaasit ja DNaasit. Tämä ominaisuus tekee proteinaasi K: sta erityisen sopivan natiivin RNA: n ja DNA: n eristämiseen kudoksista tai solulinjoista.
- Käytetään kalvorakenteiden analysointiin modifioimalla proteiineja ja glykoproteiineja solupinnoilla.
- Sopii erityisen hyvin nukleiinihappojen eristämiseen amplifikaatioreaktioita varten.
- Edistää solujen hajoamista aktivoimalla bakteerien autolyyttisen tekijän.
- Käytetään solujätteiden poistamiseen pesäkkeitä valmisteltaessa ja kudososien käsittelyyn koettimen tehokkaan tunkeutumisen varmistamiseksi in situ -hybridisaation aikana.
Käyttövalmiiksi saattamista koskevat suositukset
Varastoon liuos valmistamiseksi, suosittelemme liuottamalla lyofilisoitu jauhe puskurissa (20 mM Tris, 1 mM CaCI 2 , 2% glyseroli, pH 7,4).
Kalsium on tärkeä proteinaasi K: n termostabiilisuudelle ja pH-arvo on kriittinen korkealle liukoisuudelle.
Kylmäsuojaaineen glyserolin käyttö lopulliseen 50%: n pitoisuuteen kantaliuoksessa on estää jäätymis- / sulamisvauriot. Proteinaasi K: lla säilyi 99% aktiivisuudesta 12 pakastus- / sulatussyklin jälkeen varastoliuoksessa. Vältä toistuvaa jäätymistä ja sulatusta proteiinin saostumisen estämiseksi, jos glyserolia ei lisätä.
Proteinaasi K -liuos pysyy aktiivisena laajalla pH-alueella (4,0-12,5, käytetään usein välillä 7,5-9,0) ja laajalla lämpötila-alueella 25-75 ° C. Liuos pysyy steriilinä ja stabiilina vähintään 12 kuukauden ajan 4 ° C: ssa.
Recombinant purified Red Fluorescent Proteins (RFP/dsRed) protein control for Western blot |
RFP12-C |
Alpha Diagnostics |
100 ul |
EUR 343.2 |
Recombinant (E. coli) Red Fluorescent Proteins (RFP/dsRed) protein for ELISA or Standards (>98%) |
RFP15-R |
Alpha Diagnostics |
25 ug |
EUR 300 |
Flagellin protien (S. typhimurium), purified (TLR5 ligand), Low endotoxin |
FLGN17-N-50 |
Alpha Diagnostics |
50 ug |
EUR 489.6 |
Recombinant Human Microtubule-associated Proteins 1A/1B Light Chain 3B/MAP1LC3B |
CG98-10ug |
Novoprotein |
10ug |
EUR 169.2 |
Description: Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution of 20mM Tris, 150mM NaCl, 2mM DTT, pH8.0. |
Recombinant Human Microtubule-associated Proteins 1A/1B Light Chain 3B/MAP1LC3B |
CG98-1mg |
Novoprotein |
1mg |
EUR 2252.4 |
Description: Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution of 20mM Tris, 150mM NaCl, 2mM DTT, pH8.0. |
Recombinant Human Microtubule-associated Proteins 1A/1B Light Chain 3B/MAP1LC3B |
CG98-500ug |
Novoprotein |
500ug |
EUR 1593.6 |
Description: Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution of 20mM Tris, 150mM NaCl, 2mM DTT, pH8.0. |
Recombinant Human Microtubule-associated Proteins 1A/1B Light Chain 3B/MAP1LC3B |
CG98-50ug |
Novoprotein |
50ug |
EUR 363.6 |
Description: Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution of 20mM Tris, 150mM NaCl, 2mM DTT, pH8.0. |
Proteinase K, Recombinant, NGS Grade |
9247-100 |
Biovision |
each |
EUR 210 |
Proteinase K, Recombinant, NGS Grade |
9247-10G |
Biovision |
each |
EUR 6812.4 |
Proteinase K, Recombinant, NGS Grade |
9247-1G |
Biovision |
each |
EUR 810 |
Proteinase K, Recombinant, NGS Grade |
9247-500 |
Biovision |
each |
EUR 614.4 |
Herv-K Envelope Recombinant Protein |
1170-V-01mg |
Virogen |
0,1 mg |
EUR 321 |
|
Description: Human Endogenous Retrovirus Envelope antigen 48 kDa |
Herv-K Envelope Recombinant Protein |
1170-V-1000ug |
Virogen |
1000 ug |
EUR 1539 |
|
Description: Human Endogenous Retrovirus Envelope antigen 48 kDa |
Recombinant Human K-Cadherin Protein |
RP00244 |
Abclonal |
10 μg |
EUR 186 |
Proteinase K, Recombinant, Standard Grade |
9250-100 |
Biovision |
each |
EUR 124.8 |
Proteinase K, Recombinant, Standard Grade |
9250-10G |
Biovision |
each |
EUR 4627.2 |
Proteinase K, Recombinant, Standard Grade |
9250-1G |
Biovision |
each |
EUR 548.4 |
Proteinase K, Recombinant, Standard Grade |
9250-500 |
Biovision |
each |
EUR 314.4 |
Proteinase K, Recombinant, Standard Grade |
9251-100 |
Biovision |
each |
EUR 1266 |
Proteinase K, Recombinant, Standard Grade |
9251-25 |
Biovision |
each |
EUR 352.8 |
Proteinase K, Recombinant, Standard Grade |
9251-5 |
Biovision |
each |
EUR 144 |
Proteinase K, Recombinant, Molecular Grade |
9210-100 |
Biovision |
each |
EUR 144 |
Proteinase K, Recombinant, Molecular Grade |
9210-10G |
Biovision |
each |
EUR 3171.6 |