protienese k rekombinanttiproteiineja

Kuvaus

Thermo Scientific Proteinase K on laaja-alainen endolyyttinen proteaasi, jota käytetään laajasti proteiinien pilkkomiseen nukleiinihappovalmisteissa. Se hajottaa proteiineja jopa pesuaineiden läsnä ollessa. Proteinaasi K katkaisee peptidisidokset alifaattisten, aromaattisten tai hydrofobisten aminohappojen karboksyylipuolilla. Proteinaasi K on luokiteltu seriiniproteaasiksi. Pienin tällä entsyymillä hydrolysoituva peptidi on tetrapeptidi.

Kohokohdat

• Käyttövalmis liuos
• Aktiivinen monenlaisissa reaktio-olosuhteissa

Sovellukset

• Genomisen DNA: n
eristäminen hiiren hännästä • Genomisen DNA: n eristäminen viljellyistä soluista
• DNaasien ja RNaasien poisto eristettäessä DNA: ta ja RNA: ta kudoksista tai solulinjoista
• Entsyymipaikan määrittäminen
• PCR-tuotteiden kloonaustehokkuuden parantaminen

Huomautus

• Proteinaasi K: n suositeltu työskentelypitoisuus on 0,05–1 mg / ml. Aktiivisuus entsyymin stimuloidaan 0,2-1% SDS tai 1-4 M urea
• Ca2 + suojaa proteinaasi K vastaan autolyysin, lisää lämpöstabiilisuus, ja on säätelemään substraattia sitova kohta proteinaasi K
• Vakaa yli laaja pH-alue:
4,0-12,5 , optimaalinen pH 7,5-8,0 • Optimaalinen aktiivisuus 50-55 ° C: ssa
• Entsyymin nopea denaturoituminen tapahtuu yli 65 ° C lämpötiloissa

Kuvaus

Proteinaasi K on erittäin reaktiivinen seriiniproteaasi, jolla on kyky sulattaa natiivia proteiineja, inaktivoida siten entsyymit, kuten DNaasi ja RNaasi, turvautumatta denaturointiprosessiin. Se on tehokkain proteinaasi kaikkien tähän mennessä karakterisoitujen proteinaasien joukossa. Se pilkkoutuu peptidisidokseen alifaattisten, aromaattisten tai hydrofobisten aminohappojen karboksyylihapporyhmän viereen.

Rekombinanttia proteinaasia K käytetään suurien molekyylipainojen nukleiinihappojen eristämiseen tai valmistamiseen. Se on erittäin puhdasta ja sillä on korkeampi spesifinen aktiivisuus ja se on vakaampi huoneenlämmössä verrattuna alkuperäiseen proteinaasi K: hon.

Rekombinantti proteinaasi K: ta ilmentyy hiivasta  Pichia pastoriksesta Engyodontium-albumia (Tritirachium album) endosyyttistä proteaasia koodaavalla kloonatulla geenillä  .

 

Sovellukset

  • Rekombinantti proteinaasi K on erittäin tehokas natiivissa proteiineissa, ja sitä voidaan siksi käyttää inaktivoimaan endogeeniset nukleaasit, kuten RNaasit ja DNaasit. Tämä ominaisuus tekee proteinaasi K: sta erityisen sopivan natiivin RNA: n ja DNA: n eristämiseen kudoksista tai solulinjoista.
  • Käytetään kalvorakenteiden analysointiin modifioimalla proteiineja ja glykoproteiineja solupinnoilla.
  • Sopii erityisen hyvin nukleiinihappojen eristämiseen amplifikaatioreaktioita varten.
  • Edistää solujen hajoamista aktivoimalla bakteerien autolyyttisen tekijän.
  • Käytetään solujätteiden poistamiseen pesäkkeitä valmisteltaessa ja kudososien käsittelyyn koettimen tehokkaan tunkeutumisen varmistamiseksi in situ -hybridisaation aikana.

 

Käyttövalmiiksi saattamista koskevat suositukset

Varastoon liuos valmistamiseksi, suosittelemme liuottamalla lyofilisoitu jauhe puskurissa (20 mM Tris, 1 mM CaCI 2 , 2% glyseroli, pH 7,4).

Kalsium on tärkeä proteinaasi K: n termostabiilisuudelle ja pH-arvo on kriittinen korkealle liukoisuudelle.

Kylmäsuojaaineen glyserolin käyttö lopulliseen 50%: n pitoisuuteen kantaliuoksessa on estää jäätymis- / sulamisvauriot. Proteinaasi K: lla säilyi 99% aktiivisuudesta 12 pakastus- / sulatussyklin jälkeen varastoliuoksessa. Vältä toistuvaa jäätymistä ja sulatusta proteiinin saostumisen estämiseksi, jos glyserolia ei lisätä.

Proteinaasi K -liuos pysyy aktiivisena laajalla pH-alueella (4,0-12,5, käytetään usein välillä 7,5-9,0) ja laajalla lämpötila-alueella 25-75 ° C. Liuos pysyy steriilinä ja stabiilina vähintään 12 kuukauden ajan 4 ° C: ssa.

 

Lys proteins Antibody

ABD2705 100 ug
EUR 438

serum proteins kit dysproteinaemia

EHCA1200-KC30-R ea
EUR 114

Anti-Bovine Plasma Proteins

BPP04 1 ml
EUR 334
Description: Anti-Bovine Plasma Proteins by Cygnus Technologies is available in Europe via Gentaur.

Anti-Bovine Plasma Proteins

BPP04-AF 1 mg
EUR 1913
Description: Anti-Bovine Plasma Proteins by Cygnus Technologies is available in Europe via Gentaur.

Anti-Bovine Plasma Proteins

BPP04-PA 1 ml
EUR 488
Description: Anti-Bovine Plasma Proteins by Cygnus Technologies is available in Europe via Gentaur.

Anti-Bovine Plasma Proteins

BPP04AF-HRP 100 ul
EUR 989
Description: Anti-Bovine Plasma Proteins by Cygnus Technologies is available in Europe via Gentaur.

Lys proteins Blocking Peptide

DF2705-BP 1mg
EUR 195

K-7174

HY-12743 50mg
EUR 533

Eupalinolide K

HY-N2240 5mg
EUR 1231

K-756

HY-U00422 10mM/1mL
EUR 277

K-80003

HY-U00458 25mg
EUR 497

Hosenkoside K

HY-N2243 5mg
EUR 268

Ginkgolide K

HY-N4176 10mM/1mL
EUR 307

Terrestrosin K

HY-N5078 1mg
EUR 179

K-252a

HY-N6732 5mg
EUR 1187

Vitamin K

HY-B2172 500mg
EUR 215

Proteinase K

GE0990-100MG 100 mg
EUR 94

Proteinase K

GE0990-1G 1 g
EUR 413

Proteinase K

GE0990-250MG 250 mg
EUR 154

Proteinase K

GE0990-25MG 25 mg
EUR 58

Proteinase K

GE0990-500MG 500 mg
EUR 249

Proteinase K

P2180-010 100mg
EUR 182

Proteinase K

P2180-050 500mg
EUR 374

 

Jätä kommentti